Preambule

1. Regulovaný přístup – nutno se registrovat
2. Pro získání čipu a školení kontaktujte P. Šeba (This email address is being protected from spambots. You need JavaScript enabled to view it.@This email address is being protected from spambots. You need JavaScript enabled to view it.)
3. Vyžaduje se přísné dodržování Provozního řádu a vedení evidence přístupů a prováděných činností v Provozním deníku – nedodržování pravidel a jednání, které by omezovalo v práci ostatní uživatele, bude postiženo zamezením přístupu neukázněnému jedinci (blokací čipu)
4. Jde o prostory s podtlakovou vzduchotechnikou -50 Pa – je nutné za sebou zavírat dveře a dodržovat čistotu – místnost je na vstupu i výstupu chráněna HEPA filtry – v případě výpadku proudu se potrubí uzavře klapkami.

1. Rezervace pracovního času v GMO laboratoři 2. kategorie je nutno provést předem na adrese: http://l125lsx.mbu.cas.cz/calendar/
• username: GMO
• password: user (pozor na malá a velká písmena)
• Vyplňte v rezervaci i své jméno, kontakt (tel., e-mail) a stručný popis chystané práce a zařízení, které budete chtít používat, aby mohlo případně pracovat více lidí najednou.
  
2. Před vstupem do GMO zkontrolovat, že je zapnutý kamerový systém – nutné pro bezpečnost práce a přehled o situaci uvnitř – osoby bez přístupového čipu mohou zvně komunikovat s pracovníky interphonem a případně přivolat pomoc oprávněných uživatelů, záchranky, hasičů a pod.
3. Při vstupu do GMO prostor se každý uživatel zapíše do Provozního deníku a vyplní stručný popis prováděné činnosti, včetně uvedení přesné identifikace použitých organismů a plasmidů (rezistence) a charakteristiky činnosti. Po ukončení práce doplní způsob likvidace odpadu:
1. Příklad 1: kultivace 5 L E. coli BL21(LambdaDE3)/pT7CACT1 (Ap^R, Tc^R), zpracování biomasy, extrakt zamražen, supernatant autoklávován.
2. Příklad 2: 2 x 50 ml suspenze Neisseria meningitidis MC 58 O/N, gentamicin killing assay na infikovaných monocytech J774A.1, Pevný odpad chemicky inaktivován (SAVO) a autoklávován.
3.  Příklad 3: Pasážování buněk nebo bakteriálních kmenů – odpad autoklávován.
4. Příklad 4: Izolace leukocytů z lidské krve – 16 krevních vaků – chemicky inaktivován – poté odpad autoklávován.
4. Před zahájením práce zapnout vzduchotechniku a přívod plynu – Zmáčknout označené vypínače na stěně vlevo ve vstupní přetlakové místnosti - jinak není možné pustit přívod plynu a místnost není větraná. (Pozn. po skončení práce a vypnutí má vzduchotechnika doběh 10 min na vyčištění prostor a v případě výpadku proudu se potrubí uzavřou klapkami na náhradní bateriový zdroj.)
5. Při postupu do dalších prostor nesmí dojít k otevření obou dveří najednou (houká siréna) - aby mohla klimatizace správně pracovat, dovírat dveře.
6. !!! Nic nevylévat do výlevky !!! – ta je určena pouze k likvidaci případných havárií (v případě rozlití kultur k omývání chemicky dekontaminovaných předmětů) a neústí do kanálu, nýbrž do jímky vybavené čidly dosažení kritické hladiny. V případě použití výlevky je nutné obsah jímky chemicky inaktivovat 2 h (SAVO – 1:100) a poté teprve přečerpat do odpadu. Shnilé kultivační médium v jímce nekonečně páchne... Inaktivaci obsahu jímky a její sanitaci smí provádět pouze vyškolená pověřená osoba.
7. Používání vnitřních zařízení:
• Biohazard a inkubátor s CO₂ - Laboratoř je vybavena pro pěstování tkáňových kultur. – kontrolovat tlak plynu v bombách při vstupu do GMO v 1. místnosti. Instrukce pro použití biohazardu a inkubátoru ve formě česky psaných brožur jsou položené na polici za inkubátorem.
• Média je možné uložit do lednice.
• Centrifuga K80 (6 x 1L) je vybavená bioharzard víkem – pro meší objemy jsou k dispozici adaptery na různé kyvety – šikovnější chlazená centrifuga na tkáňové buňky bude zakoupena.
• Vodní lázeň s třepačkou – oba kusy patří laboratoři P. Šeba, která má přednost v jejich používání – je možno je používat při slušném zacházení a OZNAČOVÁNÍ – IDENTIFIKACI - KULTUR, po předběžné dohodě.
• Další potřebné přístroje budou zakoupeny postupně.
• Plastik pro tkáňové kultury - každá laboratoř má svůj. V rozumném objemu (2-3 zásobní sáčky od každého druhu) je možné skladovat v GMO na policích.
• Pipetboy v biohazardu - Každá laboratoř má vlastní filtry do Pipetboye  - kdo nasaje médium až do filtru Pipetboye je povinen jej okamžitě a z vlastních zásob vyměnit.
• Po ukončení práce v biohazardu je třeba použitý plast vyndat z nádob se SAVEM, kam se běžně ukládá v průběhu práce a v menších plastových sáčcích ho umístit do velkého koše k odnesení při úklidu.
8. Všechny misky uložené v inkubátoru musí být označeny jménem majitele a popisem obsahu (zda se jedná o buněčné linie – a jaké – zda o infikované buněčné linie, bakterie a pod.).
9. Horní police inkubátoru jsou vyhrazeny pro buněčné linie, spodní pro bakterie. Je třeba pracovat mimořádně sterilně a čistě, každá laboratoř zodpovídá za vyškolení svého pracovníka pro práci v této laboratoři. Dohled nad čistotou práce a popravu špindírů vykoná osobně P. Šebo...
10. Oční sprcha a tělová sprcha v přístupové komoře jsou určeny k použití  pouze v případě havárie – především sprcha je vysoce účinné zařízení chrlící velké spousty studené vody přímo na podlahu a stěny místnosti. Voda stéká do jímky, kde se musí chemicky inaktivovat.
11. Prostupový autokláv smí obsluhovat pouze specielně zaškolené osoby!!  Slouží k autoklávování médií a nástrojů (otevírání ze vstupní přetlakové místnosti) a k inaktivaci odpadů (otevírání z vnitřní podtlakové místnosti).
12. ! Zbytečně nesahat na páku dveří autoklávu uvnitř GMO ! - za žádných okolností se nedají otevřít oboje dveře najednou – jištěno. Pootočení páky v podtlakové/ přetlakové místnosti brání otevření dveří z přetlakové/ podtlakové místnosti.
13. Při odchodu z GMO prostor:
• Zlikvidovat odpad - chemicky nebo po předběžné domluvě vložit do autoklávu a přivolat osobu proškolenou pro obsluhu autoklávu
• Dokonale po sobě uklidit – zkontrolovat, že všechny přístroje, jež nemají pracovat, byly vypnuty (vyjma inkubátoru, lednice, mrazáku).
• Vypnout vzduchotechniku a přívod plynu – odepsat se a zhasnout!